Diagnóstico genético pré-implantação de embriões

O Diagnóstico Embrionário Pré-Implantacional (DGP) é um método de estudo de 24 cromossomas que permite detetar doenças graves num embrião obtido por fertilização in vitro antes de ser transferido para o útero da mulher.

O PGD permite estudar o ADN dos embriões e descartar aqueles que são portadores de determinadas mutações genéticas e doenças. É útil se houver um historial de anomalias cromossómicas ou genéticas.

Para evitar riscos genéticos, deve ser examinado para determinar se é portador de genes que possam expressar patologias. Caso ambos os progenitores apresentem patologias, é recomendável submeter o embrião a um diagnóstico pré-implantação. Se apenas um dos progenitores for portador do gene doente, não há motivo para preocupação: a criança nascerá perfeitamente saudável.

Como o procedimento é realizado no terceiro dia após a fecundação, é necessária a remoção de uma célula do embrião, o que não causa danos ao embrião e não perturba em nada o seu desenvolvimento. O PGD permite também determinar o sexo do feto.

A gravidez, e mais ainda, a fertilização in vitro levantam sempre muitas questões, algumas das quais, e bem, dizem respeito à saúde da mãe e da criança. Assim, no processo de gestação de substituição, o sequenciamento de última geração desempenha um papel fundamental.

O Sequenciamento de Próxima Geração (NGS) foi desenvolvido há mais de uma década para facilitar a sequenciação de grandes quantidades de dados genómicos. O NGS para diagnóstico clínico é amplamente utilizado atualmente, uma vez que permite que um painel de genes associados à doença (sequenciação dirigida) seja analisado através da sequenciação completa do exoma (também conhecida como sequenciação clínica do exoma da doença) ou mesmo permitindo a sequenciação de todo o genoma.

O método NGS faz parte de um programa de fertilização in vitro com diagnóstico pré-implantação. Os exames e a preparação dos cônjuges para a fertilização in vitro utilizando ou não o método NGS não são diferentes.

A precisão dos testes para doenças cromossómicas ou monogénicas é de aproximadamente 99,9%. O processo de diagnóstico é totalmente automatizado e, por isso, garante um resultado de elevadíssima precisão.

O método NGS é recomendado nos seguintes casos:

• Se os cônjuges já passaram por várias tentativas de FIV sem obter gravidez, e se várias gravidezes não foram bem sucedidas, no caso dos abortos espontâneos precoces. A não ocorrência de gravidez está frequentemente associada à presença de anomalias cromossómicas no embrião.
• O diagnóstico pré-implantação através do NGS permite selecionar um embrião geneticamente saudável com uma elevada probabilidade de implantação e, por conseguinte, reduzir consideravelmente os riscos acima referidos.
• Se os familiares mais próximos dos cônjuges sofrem de doenças hereditárias graves, o método NGS pode ser a solução.
• A idade é também uma das indicações para a NGS. De facto, com o tempo, a probabilidade de desenvolver anomalias cromossómicas, especialmente nas mulheres, aumenta significativamente.

De notar que o risco de mutações cromossómicas (aneuploidia) no óvulo não depende do método de conceção.

A hibridização in situ fluorescente (FISH) é uma técnica citogenética molecular que utiliza sondas fluorescentes que se ligam apenas a porções de uma sequência de ácido nucleico com um elevado grau de complementaridade de sequência.

A técnica FISH é mais comummente utilizada para determinar a composição cromossómica do embrião. Ao contrário do cariótipo, pode ser aplicado a cromossomas interfásicos, podendo ser utilizado em amostras de PBs, blastómeros e TE. As células são fixadas em lâminas de vidro para microscópio e hibridizadas com sondas de ADN. Cada uma destas sondas é específica de uma parte de um cromossoma e está marcada com um fluorocromo.

O método FISH é considerado uma técnica de pré-implantação eficaz para determinar o sexo de embriões humanos, ao mesmo tempo que permite a deteção de um número anormal de cópias cromossómicas, o que não é possível através da reação em cadeia da polimerase (PCR).

Com a idade, ocorrem erros cromossómicos nas células reprodutoras humanas (óvulos e espermatozóides), o que reduz as hipóteses de gravidez, leva ao aborto espontâneo ou à falha de implantação. O PGD pelo método FISH realizado no âmbito da fertilização in vitro permite selecionar os embriões mais saudáveis ​​e transferi-los para o útero, o que maximiza as hipóteses de implantação do embrião no útero e, por conseguinte, de o levar a dar à luz um bebé perfeitamente saudável.